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單克隆抗體的制備與應(yīng)用
  • 發(fā)布日期:2023-05-23      瀏覽次數(shù):409
    • 概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
      特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。

      一、單抗的制備過程:
      1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
      2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
      3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
      4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌ling (H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
      5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
      6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。

      二、單克隆抗體的應(yīng)用:
      1、診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
      2、藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)"
      3、分離和純化抗原分子。

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