無論是對試驗的硬件條件還是對試驗的操作人員的技能要求，ELISA的試驗操作所要求的條件是比較嚴格的，稍有不慎，前功盡棄。
1、如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，核算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
2、濃洗刷液或許會有結晶分出，ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響效果。
3、封板膜只限一次性運用，以避免交叉污染。
4、各步加樣均應運用加樣器，并經常校正其正確性，以避免實驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)目多，舉薦運用排槍加樣。
5、嚴格按照說明書的操作進行，ELISA試劑盒實驗效果斷定有必要以酶標儀讀數(shù)為準.
6、從冷躲環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝進密封袋中保存。
7、一切樣品，洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。
8、本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
9、假設ELISA試劑盒樣品不立即運用，應將其分紅小部分-70℃保存，防止重復冷凍。盡或許的不要運用溶血或高血脂血。假設血清中很多顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍住。應在室溫下凍住并確保樣品均勻地充沛凍住。
