ELISA的根底是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶符號的抗原或抗體既保存其免疫學(xué)活性，又保存酶的活性。 在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。再參加酶符號的抗原或抗體，也經(jīng)過反響而結(jié)合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)品，產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量剖析。
ELISA試劑盒在確認(rèn)收貨以后，不一定一次性就會用完，這就得需要把剩余的保存起來，關(guān)于它的保存，這幾點一定要注意...
一、要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后面參加的HRP底物反響顯色。
二、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長，其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分解效果；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
三、血清標(biāo)本如是以無菌操作別離，則能夠在2～8℃下保存一周，ELISA試劑盒如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的保存，應(yīng)在-70℃以下。
四、冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等造成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生破壞效果，然后引起假陰性成果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意，不要進行劇烈振蕩，重復(fù)顛倒混勻即可。
五、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時，ELISA試劑盒應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
