實驗流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注：上述樣品建議經(jīng)過增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測。 
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物：取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸棄上清，加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。 
IL17RD Others Canine 狗 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照) (光譜SP)Potassium bromide質(zhì)量規(guī)格：光譜SP

大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106偶氮胂Ⅰ水合物(90%)Arsenazo I Hydrate質(zhì)量規(guī)格：0.9

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 舌鱗癌細胞，Tca-8113細胞 MADB106細胞，大鼠腺癌細胞系(SP) sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：SP

人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2二甲基砜(核磁共振定量標準品)Dimethyl sulfone質(zhì)量規(guī)格：核磁共振定量標準品

PECAM1 Others Mouse 小鼠 PECAM1 / CD31 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-(標準品)1,3-Propanediol質(zhì)量規(guī)格：分析標準品
CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉TAPS  Salt質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

Wistar大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 Wistar rat bone marrow mesenchymal stem cellsTAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)

SH-SY5Y細胞，人神經(jīng)上皮瘤細胞 粘質(zhì)沙雷氏菌 人肝細胞RNAHH miRNA5 μg二甲基偶氮磺IIIDimethylsulfonazo III質(zhì)量規(guī)格：堿性稀土金屬用的分光光度試劑及硫酸根用鋇的沉淀滴定指示劑

SK-CO-1(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Sulfonazo III 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)

HCT-8(人盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;MMK32-(4-磺基苯偶氮）-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC))3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)
人結(jié)直腸腺癌細胞;HT-29大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標準品）Emodin-8-glucoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

PLAU Others Human 人 Urokinase / PLAU (activated by ypsin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 異蓮心堿（標準品）Isoliensinine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

Daudi 人成巨核細胞白血病細胞蓮心堿高氯酸鹽（標準品）Liensinine Perchlorate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

LoVo人結(jié)腸癌細胞 LoVo human colon cancer cells DMEM/F12(1:1)+10% FBS丁1基苯酞（標準品）3-Butylidenephthalide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品川芎提取,液體

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)茯苓酸（標準品）Pachymic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
橘核PCR鑒定試劑盒直銷ACHN(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2Eserine伊色林500克BR，98%

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3，3’-二安基聯(lián)本安 3,3'-Dicminobqnzidinq 91-92-

牛腎細胞;MDBK(BVDV-free)DNHP1,2-本二酸二己酯1克BR，98%

CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFS
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。