更新時(shí)間:2023-10-26
BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50菌株一種常用于質(zhì)??寺〉木辍F洇?0lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50以下是的訂購信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*503. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*502. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會(huì)降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒廠家 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒廠家 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒廠家 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA試劑盒廠家 大鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒廠家 大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒廠家 大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat N-acetyl-β-D-glucosaminida se,NAG ELISA Kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量,靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠N-BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒廠家 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS E