更新時間:2023-10-26
pFMV35S基因核酸檢測試劑盒公司相關產(chǎn)品RKO細胞,結腸腺癌細胞 鼻咽癌細胞系,SUME-a細胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞)5×106cells/瓶×22′-脫氧胞苷 鹽酸鹽0.992′-Deoxycytidine 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA1酸氫二銨SPAmmonium phosphatedi basic
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:pFMV35S基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T 0.2PCR管
編號:BH-P97056
分類:PCR-熒光探針法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
CM-R043大鼠小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL1酸氫鉀(>98%,BC)Potassium hydrogen tartrate>98%,BC
U251膠質瘤細胞乙基黃原酸鉀(>95%,BC)Potassium O-ethyl xanthate>95%,BC
EB病毒轉化的B細胞;HH-29 腦膜細胞*培養(yǎng)基 100mL油酸鉀(>96%,BR)Potassium oleate>96%,BR
上皮細胞;MCF-10A1酸氫二鉀三水(分子生物學級)Potassium phosphate, dibasic, trihydrate>98.5%,分子生物學級
IL5 Others Mouse 小鼠 IL5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三鉀三水(>98%,BC)Potassium phosphate, tribasic trihydrate>98%,BC
DMS153細胞,小細胞肺癌細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞,PC12細胞 CM-H127晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基100mL精胺二1酸鹽美國進口Spermine diphosphate salt
PANC-1(胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2-N,S-二氧化物美國進口Ranitidine-N,S-dioxide
Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml去甲基美國進口Desmethyl Ranitidine
小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤;M5076N-氧化物美國進口Ranitidine N-Oxide
NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 細胞裂解液 (陽性對照) 京尼平()HPLC≥98%,Genipin
pFMV35S基因核酸檢測試劑盒HCCC-9810(肝內膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0393NCI-H209(小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;VERO德利肥素,英文名或英文縮寫:Destomycin,級別:生物技術級,90%,規(guī)格:200U
肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1間三拂基本全 3-(Trifluoromqthyl)bqnzcldqhydq 424-89-7
PON3 Others Human PON3 / Paraoxonase 3 (50 Ser/Asn) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學級白色精細結晶粉末COLDsigma
CM-R046大鼠腸上皮細胞*培養(yǎng)基100mLβ-奈氧乙酸,英文名或英文縮寫:BNOA,級別:高,95%,規(guī)格:25KU
RL95-2, 內膜腺癌細胞系 羊膜細胞,H.A.細胞 WERI-Rb-1(視網(wǎng)膜母細胞瘤)112246-73-8(+)-二異蒎基錄(+)-Diisopinocampheyl chloroborane
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。