訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：GUS基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
規(guī)格：48T  0.1PCR管
編號：BH-P97065
分類：PCR-熒光探針法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CM-H029臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL糊精;白糊精DextrinBR

DU145細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞 涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞,Acc-3細(xì)胞 整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]鹽酸芐達(dá)明Benzidamine HCl>98%,BR

615小鼠癌瘤株;Ca761葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)Sephadex G-50分類范圍3×100000

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)Sephadex G-50分類范圍3×100000

皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1L-(+)-扁桃酸;S-扁桃酸(S)-(+)-Mandelic acid>99.0%,BR
CL-0403NCI-H524(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2偶氮磺III(>90.0%(HPLC))>90.0%(HPLC)Sulfonazo III

ACBD6 Others Human  ACBD6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-(4-磺基苯偶氮）-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸三鈉鹽水合物(>95.0%(HPLC))>95.0%(HPLC)3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate

臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHUVEC NA2,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T))>98.0%(T)2,2'-Dihydroxyazobenzene

Jecket細(xì)胞，瘤細(xì)胞 肺腺癌細(xì)胞,SPC-A1細(xì)胞 EC109，食管癌細(xì)胞S-乙酰半鹽酸>98%,BRS-Acetamidomethyl-L-cysteine

貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)O-叔丁基-L-甲酯鹽酸鹽0.98O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester
GUS基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-苯甲酰-N-苯基羥胺;鉭試劑;BPHA>98%;ARN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon

侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;C9186-氯核苷>98%,BR6-Chloroguanosine

HuH-7細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 小鼠樣瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 小型豬腎細(xì)胞;MPK-5'-三1酸三鈉鹽>95%,BRITP•Na3

MDA-MB-435S(導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鳥苷-5'-三1酸二鈉鹽>95%,BRGTP.Na2

Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV2套裝 500ml4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))>95.0%(N)4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。