更新時(shí)間:2023-10-28
驢源性成分(Don)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL耐爾藍(lán)A(>65%,BS)Nile blue A>65%,BS癌細(xì)胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-Z-β-Ala-OH0.98TYRP1 Others Human P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CBZ-D-α-芐酯Z-Glu-
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:驢源性成分(Don)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96948
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
H4(腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(急性細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1戊基尼泊金Pentyl Paraben美國(guó)進(jìn)口
小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));DG6-VAP33-GFP尼泊金丁酯-d9Butyl-d9 Paraben美國(guó)進(jìn)口
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(HRPEpiC)(5×105 )尼泊金乙酯-d5Ethyl-d5 Paraben美國(guó)進(jìn)口
CM-M051小鼠頸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL尼泊金甲酯-d4Methyl Paraben-d4美國(guó)進(jìn)口
小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815 小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL尼泊金芐酯Benzyl Paraben美國(guó)進(jìn)口
牛源細(xì)胞 肝癌細(xì)胞,HCCLM3細(xì)胞 C3細(xì)胞,小鼠白血病細(xì)胞重樓皂苷VI()HPLC≥98%,Polyphyllin VI
胚腎細(xì)胞(SV40T基因修飾);293T/17重樓皂苷VII()HPLC≥98%,Polyphyllin VII
COCH Others Human COCH / Cochlin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ≥97%,BRHyodeoxycholic acid
CL-0112HMy2.CIR(B母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2()含量測(cè)定Hyodeoxycholic acid
DDC Others Human DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ()效價(jià)測(cè)定Nystatin
驢源性成分(Don)核酸檢測(cè)試劑盒SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23,4-二羥基shēng huà shì jì容量:RT5克
HCC1937(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK24,4-二叔丁基-2,2-聯(lián) 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3
侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;M6192,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量:RT100克
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Myoglobinfromeinoneeskeletalmuscle肌球素25克BR,2-6u/mg
絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞59-92-73-(3,4-二羥基本)-L-酸;L-多巴; 多巴; L-β-3,4-二羥基本酸; β-[3,4-二羥本基]L-初油基酸3-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Levodopa; 3-xy7noxy-L-tyrosine; 2-AMino-3(3,4-dixy7noxypxenyl)propanoic acid; β-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Bendopa; Deadopa;