更新時間:2023-10-29
副流感病毒4型核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品MCF7B細胞,癌細胞 癌Tamoxifen耐藥株,LCC2細胞 脂肪細胞生長添加物PAGS脫氫Dehydro Nifedipine美國進口水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4脫氫-d6Dehydro Nifedipine-d6美國進口IL1RL1 Others Human IL1RL1 / DER4 細胞裂解液 (陽性對照) 7-芐氧基-
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:副流感病毒4型核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96359
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1殺螟丹標準溶液(10μg/ml,u=3%)Aramite solution10μg/ml,u=3%
SKOV3 [SK-OV-3], 卵巢癌腺癌細胞系莎稗1()Anilofos分析,98.5%
B細胞瘤細胞;RAMOS 大鼠胰島細胞*培養(yǎng)基 100mLAmberlite® IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級凝膠強堿Ⅱ型陰離子交換樹脂)Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin719(202)是高等級凝膠強堿Ⅱ型陰離子交換樹脂
外周血白細胞Many types of cells(1ml)1酸二氫銨(分析,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%)Ammonium phosphate monobasic分析,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%
APLP1 Others Human APLP1 / Amyloid-like protein 1 細胞裂解液 (陽性對照) 1酸二氫銨(for HPLC,≥99.0%(T))Ammonium phosphate monobasicfor HPLC,≥99.0%(T)
SFRP1 Others Human sFRP1 / SARP2 細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-4-甲氧基肉桂酸美國進口3-Hydroxy-4-methoxycinnamic Acid
CL-0047C6(大鼠膠質(zhì)瘤細胞)5×106cells/瓶×2-d3美國進口Pyrazinamide-d3
CSAG1 Others Human CSAGE / CSAG1 細胞裂解液 (陽性對照) 美國進口Demeclocycline
小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基 100mL鹽酸半水化合物美國進口Demeclocyclin hemihydrate
293LVT胚腎細胞--用于慢病毒包裝 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine乙基2-(6-氨基-2,3-二氯芐)(阿那格雷雜質(zhì)A)美國進口Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A)
副流感病毒4型核酸檢測試劑盒臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C鄰硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量:100克
CMA1 Others Human CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1
草魚腎細胞;GIK鋅shēng huà shì jì容量:RT5克
T24細胞,膀胱移行細胞癌細胞 高分化鱗癌細胞,HCC細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KMY0908堿式碳酸鋅shēng huà shì jì容量:50毫升
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde