更新時(shí)間:2023-10-30
牛病毒性腹瀉病毒核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 脫氟鈉Defluoro Atorvastatin Salt 美國(guó)進(jìn)口小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL內(nèi)酯-d5Atorvastatin-d5 Lactone美國(guó)進(jìn)口Rb細(xì)胞,視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 宛氏擬青霉 癌細(xì)胞;MDA
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:牛病毒性腹瀉病毒核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96642
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
ST6GAL1 Others Human ST6GAL1 / SIAT1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羥基匹格列酮(M-Ⅱ)(非對(duì)映)Hydroxy Pioglitazone (M-II) (Mixture of Diastereomers)美國(guó)進(jìn)口
CSSTL1 中華鱉肺來(lái)源細(xì)胞羥基匹格列酮(M-Ⅳ)β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Pioglitazone (M-IV) β-D-Glucuronide美國(guó)進(jìn)口
T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL羥基匹格列酮(M-Ⅶ)β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Pioglitazone (M-VII) β-D-Glucuronide美國(guó)進(jìn)口
GC-1, 鼠精原細(xì)胞3-(L-4-氨基-2-羥基-丁酰) A (丁胺雜質(zhì) A)3-(L-4-amino-2-hydroxy-butyryl)kanamycin A (Amikacin Impurity A)美國(guó)進(jìn)口
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMYF 關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL反式拉坦前列素trans Latanoprost美國(guó)進(jìn)口
NCI-H1650細(xì)胞,肺支氣管癌細(xì)胞 小鼠前列腺癌細(xì)胞,RM-1細(xì)胞 CM-R031大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL()BicalutamideHPLC>98%,
Raji(Butt's瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Busulfan/Myleran>98.5%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Promocell C-28050 DC Generation Medium, 樹(shù)突狀細(xì)胞生成培養(yǎng)基(即用型) 250ml()Busulfan/MyleranHPLC>98%,
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)Lomustine>98%,BR
TNFRSF12A Others Human TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ()LomustineHPLC>98%,
牛病毒性腹瀉病毒核酸檢測(cè)試劑盒TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLD-XYLOSED-木糖美國(guó)藥典級(jí) 5 KG
鯉魚(yú)尾鰭細(xì)胞;YZ161-(2-拂本基), 99% 1-(2-Fluorophqnyl)pipqrczinq 1011-12-0
支氣管平滑肌細(xì)胞 (HBSMC)( 5×105 )流醋 McgnqsiuM Sulphctq 7487-88-9
CL-0268COLO 201(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Gumbenzoin安息香浸膏10克AR,99%
低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL草酸二乙酯;乙二酸二乙酯;草酸乙酯Dietxyl oxalate;Dietxyl ethanedioate;Oxalic acid dietxyl ester