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茯苓探針法PCR鑒定試劑盒*

更新時間:2023-10-30

簡要描述:

茯苓探針法PCR鑒定試劑盒*公司相關(guān)產(chǎn)品分子量:676.80
芹菜素-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷 Apigenin 7-O-(2G-rhamnosyl)gentiobioside 芹菜素-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷 Apigenin 7-O-(2G-rhamnosyl)gentiobioside 174284-20-9 分子式:C33H40O19

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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

茯苓探針法PCR鑒定試劑盒*

英文名稱

Poria

貨號

BH-P99546

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,65,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
MOLT-4 人急性母細胞白血病細胞蘋果酸舒尼替尼Sunitinib Malate質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR

NCI-H1975人肺腺癌細胞 Human lung adecarcima cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS蘋果酸舒尼替尼(標準品)Sunitinib Malate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標簽)舒洛芬Suprofen質(zhì)量規(guī)格:>98%

SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞;WI38/VA13 人胰島β細胞*培養(yǎng)基 100mLTacrolimus /FK506 mohydrate質(zhì)量規(guī)格:≥98%,細胞培養(yǎng)級

人內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B(標準品)Tacrolimus /FK506 mohydrate質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品
人細胞;Hela P10s-11F1,3-二溴-7-叔丁基芘(>97.0%(GC))1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

豚鼠源細胞 貓腎細胞,F81細胞 FDC-P1細胞,小鼠骨髓細胞6,12-二溴屈(>98.0%(HPLC))6,12-Dibromochrysene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

人肝細胞;HL-7702[L-02]2,5-二苯基惡唑(>98%,BC)PPO質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

PRSS2 Others Mouse 小鼠 PRSS2 / y2 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙醇酸鈉(>98%,BR) glycolate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

肝星形細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)司班60Span* 60質(zhì)量規(guī)格:BR
MDA-MB-415 人腺癌細胞(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Palmatine

HFL1人胚肺成纖維細胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培養(yǎng)基+10%FBS鹽酸西那卡塞;鹽酸甲狀旁腺激素質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCinacalcet HCl,AMG073

SCGB1A1 Protein Mouse 重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽)質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BRPalmatine

人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 人氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/mg,進分Pronase E

小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14粉防己堿;(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Tetrandrine
茯苓探針法PCR鑒定試劑盒*RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元堿性氧化鋁1公斤

人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2 人成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL膽減氧化酶(-20) CHOLINq OXIDcSq 908-67-2

人表皮角質(zhì)細胞-新生HEK-nN,N'-羰基二咪唑 1,1'-Carbonyldiimidazole (CDI) 530-62-1 10G 通用試劑

RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鈉測試盒(帶標準)10RT

大鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL(dNTP混合物)
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

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