更新時間:2023-10-30
斑點熱立克次體核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品5637膀胱癌細胞 5637 human bladder cancer cells 1640+10% FBS2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole>98.0%(HPLC)(T)TNF Protein Human 重組 TNF-alpha / TNFA 蛋白1-氨基芘(>9
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:斑點熱立克次體核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96618
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
SW038-C2-tk細胞,轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細胞 副溶血性弧菌 臍靜脈平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg潑尼Prednisone>98%,USP30,BR
SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2潑尼()PrednisoneHPLC>98%,
Hep 3B(肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0434SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2 腎小管上皮細胞;HKC堿/一水合物Doxycycline monohydrate/Doxycycline base>900μg/mg,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
組織細胞瘤細胞;U937 [U-937]唑來1酸Zoledronic acid hydrate>99%,一水化合物,BR
LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 細胞裂解液 (陽性對照) 唑來1酸()Zoledronic acid hydrateHPLC>98%,
MDA-MB-435細胞,癌高轉(zhuǎn)移細胞 鼠癌細胞系,MA-782細胞 原代滑膜皮細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells 500/100mlL-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-乙酯鹽酸鹽>98%(T),BRL-Mine ethyl ester
PATU8988(胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2L-乙酯鹽酸鹽0.98L-Tyrosine ethyl ester
HDLEC adult Pellet 類皮膚管內(nèi)皮細胞團塊(成年捐獻者) > 1 mio.cells 角質(zhì)細胞生長添加物(不含BPE)KGS-2L-天冬氨酸-β-芐酯/L-天冬氨酸-4-芐酯>98%,BRL-Aspartic acid β-benzyl ester
CL-0324BT-20(癌細胞)5×106cells/瓶×2L-半甲酯鹽酸鹽>98%,BRL-Cysteine methyl ester
ROR1 Others Human ROR1 細胞裂解液 (陽性對照) 甲酯鹽酸鹽>98%,BRGlycine methyl ester
斑點熱立克次體核酸檢測試劑盒EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽)4-(N,N-二苯氨基)苯(>98.0%(GC)(N))>98.0%(GC)(N)4-(N,N-Diphenylamino)benzaldehyde
Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1三(4-苯)胺(>96.0%(GC))>96.0%(GC)Tris(4-iodophenyl)amine
小膠質(zhì)細胞裂解物HML賓雪德拉氏綠隱色堿(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)Bindschedler's Green Leuco Base
CLEC7A Others Human CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 細胞裂解液 (陽性對照) 雙(4-苯基)胺(>98.0%(GC))>98.0%(GC)Bis(4-iodophenyl)amine
胃癌細胞;MKN-451-溴芘(>94.0%(GC))>94.0%(GC)1-Bromopyrene
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。