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羅漢果探針?lè)≒CR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2023-11-01

簡(jiǎn)要描述:

羅漢果探針?lè)≒CR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)公司相關(guān)產(chǎn)品 胰蛋白胨大豆肉湯顆粒 Tryptose Soya Broth
堿性藍(lán)262580-56-5 Basic Blue 26 胰蛋白胨大豆肉湯TSB(1kg) 1kg
2,4-二羥基-4’-硝基偶氮苯74-39-5 Azoviolet 胰蛋白胨大豆肉湯
4-[(2,4-二羥基苯基)偶氮]苯磺酸鈉547-57-9

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實(shí)驗(yàn)流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品名稱

羅漢果探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)

英文名稱

momordicae

貨號(hào)

BH-P99309

特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 76,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過(guò)增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測(cè)。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說(shuō)明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購(gòu)上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過(guò)柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無(wú)菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注:陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無(wú)需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽(yáng)性對(duì)照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽(yáng)性對(duì)照。
P388D1(
小鼠樣瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefazolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)Piperacillin  質(zhì)量規(guī)格:>900μg//mg,USP,BR

CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (標(biāo)準(zhǔn)品)Piperacillin  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

LNCaP 前列腺癌環(huán)吡司胺; Ciclopirox Olamine質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Hs 578T人癌細(xì)胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS環(huán)吡司胺; (標(biāo)準(zhǔn)品)Ciclopirox Olamine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Promocell C-23061 Skeletal Muscle CellDiffereiation Medium, 骨骼肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基(即用型) 500ml-DL-Glycyl-DL-leucine質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分

前脂肪細(xì)胞分化生長(zhǎng)添加物PAdDSL-L-Pipecolic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-L-rvaline質(zhì)量規(guī)格:99%,BR

人前列腺癌細(xì)胞;LNCaPL-L-tert-Leucine質(zhì)量規(guī)格:0.99

HuH7-HCV細(xì)胞,人感染HCV肝癌細(xì)胞 小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MA-891細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7L-茶氨酸L-Theanine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-aEpiCGS-2-a鹽酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定Cefetamet pivoxil

荷蘭白花奶肺細(xì)胞;DCL1 肺腺癌細(xì)胞,SPA-A1細(xì)胞 SCaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞)L-生物喋呤質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Biopterin

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM0501渥曼質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國(guó)進(jìn)口,PI3K/AKT通路的抑制劑Wortmannin

FZD5 Others Human Frizzled-5 / FZD5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 溴化新斯的明質(zhì)量規(guī)格:>98%Neostigmine bromide

Ca Ski, 人細(xì)胞鹽酸頭孢卡品酯質(zhì)量規(guī)格:JP;722~764μg/mgCefcapene pivoxil HCl
羅漢果探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū)T24, 人膀胱癌細(xì)胞 胚癌細(xì)胞,Pcc4細(xì)胞 NCI-H1299(人肺癌細(xì)胞)十一醛shēng huà shì jì容量:25

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP2,6-二錄醌-4-錄亞安 2,6-Dichloroineonq-4-chloroimidq 101-38-

FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 四甘醇,英文名或英文縮寫(xiě):TEG,級(jí)別:AR98.5%,規(guī)格:5

人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2葡萄球菌選擇性瓊脂shēng
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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