更新時(shí)間:2023-11-03
貓杯狀病毒(FCV)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品FCGRT & B2M Others Human FCGRT & B2M Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L--α-酮戊二酸鹽(2:1)L-Arginine AKG 2:1>98%,BREC-304? 血管內(nèi)皮細(xì)胞L--5-甲酯L-Glutamic acid 5-methyl ester0.98CM-M054小鼠成纖
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:貓杯狀病毒(FCV)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96824
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
LYG1 Others Human Lysozyme G-like 1 / LYG1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三十烷醇(>98%,植物激素級(jí))Triacontanol>98%,植物激素級(jí)
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 癌細(xì)胞4-羥基苯(>98.0%,BR)4-Hydroxybenzaldehyde>98.0%,BR
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 正常細(xì)胞,Hs 181.Tes細(xì)胞 LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)低內(nèi)牛血清白蛋白Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin>97%,Biotech Grade
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]梭菌蛋白酶Clostripain酶活:>50U/mg,進(jìn)分
TNFRSF21 Others Human DR6 / TNFRSF21 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2'-脫氧鳥苷-5'-一1酸二鈉鹽(分子生物學(xué)級(jí))dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt>98%,分子生物學(xué)級(jí)
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6)R-(-)-硫酸氫鹽美國(guó)進(jìn)口R-(-)-Clopidogrel Hydrogen Sulfate
HMGB1 Others Human HMGB1 / HMG1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 萘普酮-d3美國(guó)進(jìn)口Nabumetone-d3
敘利亞倉(cāng)鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1DL-4-羥基-2-酮戊二酸二鈉鹽美國(guó)進(jìn)口DL-4-Hydroxy-2-ketoglutarate di salt
OPTN Others Human Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3(R,S)-羥基去氧孕1美國(guó)進(jìn)口3(R,S)-Hydroxy Desogestrel
卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)硫酸氫鹽美國(guó)進(jìn)口Clopidogrel hydrogen sulfate
貓杯狀病毒(FCV)核酸檢測(cè)試劑盒骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]膽甾醇乙酸脂,英文名或英文縮寫:Cholesteryl acetate,級(jí)別:高,98%,規(guī)格:200U
CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 肖醋鈰 99% CqRIUM(III) nitncTq HqXcHYDRcTq 1094-41-4
CM-H106內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLAMMONIUMPHOSPHATE,MONOBASIC嶙酸二氫ACS級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
MGC803-GFP細(xì)胞,綠色熒光蛋白標(biāo)記胃癌細(xì)胞 成骨肉瘤細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GPL-MINEL-甲(蛋酸)美國(guó)藥典級(jí)500G63-68-3COLD
Eca-109(食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2a-Amylase 500g 國(guó)產(chǎn)