更新時間:2023-11-05
禽皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒規(guī)格是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
禽皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒規(guī)格組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、禽皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒規(guī)格 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
禽皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒規(guī)格2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
C8orf30A 8號染色體開放閱讀框30a抗體
CYP11A1 細胞色素P450 11A1抗體
CPT1A 肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A抗體
CDC42 細胞分化周期CDC42蛋白抗體
Phospho-CDC42 (Ser71) 磷酸化細胞分化周期CDC42蛋白抗體
CAP2 環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗體
CD15 階段特異性胚胎表面抗原-1抗體
C20orf202 20號染色體開放閱讀框202抗體
CCL28 粘膜相關上皮趨化因子28抗體
CEA(C3) 癌胚抗原單克隆抗體(包被)
CEA(B5) 癌胚抗原單克隆抗體(檢測)
Raf1 癌基因c-Raf抗體
Collagen III Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體
CD63 黑色素瘤相關抗原抗體
CD33 CD33抗體
CNTF Receptor alpha 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體
CD7 CD7抗體
CDX2 尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體
CD68 CD68抗體
Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體
CD46 膜輔蛋白抗體
CXCL16 CXC趨化因子16抗體
禽皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒規(guī)格COX IV 氧化酶IV亞型1抗體
C1orf227 1號染色體開放閱讀框227抗體
C2orf71 2號染色體開放閱讀框71抗體