更新時間:2023-11-05
洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒規(guī)格是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒規(guī)格組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒規(guī)格3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒規(guī)格3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
根蛋白抗體 英文縮寫: Radixin
視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白2抗體 英文縮寫: Rb2 p130
維甲酸受體G抗體 英文縮寫: RXR gamma
Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體 英文縮寫: RASA1
磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關蛋白抗體 英文縮寫: phospho-RASA1 (Tyr460)
環(huán)指蛋白87 英文縮寫: RNF87
磷酸化RhoA蛋白抗體 英文縮寫: Phospho-RhoA(Ser188)
細胞衰老抑制基因蛋白抗體 英文縮寫: RSL1D1
中間絲相關蛋白抗體 英文縮寫: Repetin
環(huán)指蛋白86 英文縮寫: RNF86
環(huán)指蛋白2抗體 英文縮寫: RING2
環(huán)指蛋白44抗體 英文縮寫: RNF44
環(huán)指蛋白40抗體 英文縮寫: RNF40
環(huán)指蛋白8抗體 英文縮寫: RNF8
RAS蛋白樣激活劑1抗體 英文縮寫: RASAL1
Ras相關結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體 英文縮寫: RASSF2
抑癌基因PDLIM4抗體 英文縮寫: RIL
RAS抑制蛋白1抗體 英文縮寫: RIN1
周期素D相關蛋白抗體 英文縮寫: RUNX1T1
Rho家族GTP酶3抗體 英文縮寫: RND3
環(huán)指蛋白139抗體 英文縮寫: RNF139
Rho GTP酶激活蛋白29抗體 英文縮寫: Rho GTPase activating protein 29
食道癌抑制生長蛋白抗體 英文縮寫: RSRC2
RAS家族關聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 英文縮寫: RASSF8
雄激素受體相關蛋白24抗體 英文縮寫: Ran
洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒規(guī)格癌基因RAS相關蛋白Rab25抗體 英文縮寫: Rab25
核受體RXRβ抗體 英文縮寫: RXR beta
維甲酸受體γ抗體 英文縮寫: RAR gamma