更新時間:2023-11-05
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒品牌組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒品牌樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒品牌樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可保存,但應(yīng)避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
環(huán)指蛋白133抗體 英文縮寫: RNF133
垂體瘤細胞凋亡抗體 英文縮寫: RHBDD3
環(huán)指蛋白122抗體 英文縮寫: RNF122
RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體 英文縮寫: RRAGC
環(huán)指蛋白36抗體 英文縮寫: RNF36
受體相互作用蛋白激酶1抗體 英文縮寫: RIP1
環(huán)指蛋白7抗體 英文縮寫: RNF7
核糖體蛋白S3抗體 英文縮寫: RPS3
原癌基因R-Ras抗體 英文縮寫: RRAS
磷酸化指狀蛋白RET抗體 英文縮寫: Phospho-Ret (Tyr905)
染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體 英文縮寫: RCC2
Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體 英文縮寫: RACGAP1
結(jié)合蛋白抗體 英文縮寫: Retinol binding protein
補體應(yīng)答基因32抗體 英文縮寫: RGC32
液體細胞堿性蛋白1樣蛋白抗體 英文縮寫: RSBN1L
E3泛素蛋白連接酶144A抗體 英文縮寫: RNF144
轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4抗體 英文縮寫: RFX4
Rab溶酶體相互作用蛋白樣2抗體 英文縮寫: RILPL2
12號染色體開放閱讀框52抗體 英文縮寫: RITA
梅克爾憩室綜合征相關(guān)蛋白5抗體 英文縮寫: RPGRIP1L
β1,3-N-乙酰糖基轉(zhuǎn)移酶抗體 英文縮寫: Radical Fringe
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒品牌RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位1抗體 英文縮寫: RAB3GAP1
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位2抗體 英文縮寫: RAB3GAP2
維甲酸誘導蛋白1抗體 英文縮寫: RAI1
環(huán)指蛋白13抗體 英文縮寫: RNF13