更新時間:2023-11-07
雷丸探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 菌種芽孢培養(yǎng)基 Bacillus 658-56-0 VB6 菌落總數(shù)檢測培養(yǎng)基 1268-19-9包裝 VB12 軍團菌檢測培養(yǎng)基 磷酸吡哆醛41468-25-1 PLP 桔汁瓊脂 Orange Serum Agar
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 雷丸探針法PCR鑒定試劑盒說明書 |
英文名稱 | Omphalia |
貨號 | BH-P99513 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
HCMEC-c 人類心臟微血管內(nèi)皮細胞(HCMEC) 500,000cells 腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)(標準品)Hydrocortisone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
神經(jīng)膠質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)富馬酸伊布利特Ibutilide fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SORCS1 Others Human 人 SORCS1 人細胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸伊布利特(標準品)Ibutilide fumarate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Oregon vole 俄勒岡地鼠硫酸異帕米星Isepamicine Sulphate質(zhì)量規(guī)格:含量≥670µg/mg
豬腎細胞;PK(15)蓓薩羅丁;貝沙羅汀Bexarotene質(zhì)量規(guī)格:>99%
RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]三苯基溴化锍(>98.0%(T))Triphenylsulfonium Bromide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-溴咪唑并[1,2-a]吡嗪6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine質(zhì)量規(guī)格:>98%
小腸平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1,2-1,2-Propanediol質(zhì)量規(guī)格:AR,分析
NCI-H209細胞,人小細胞肺癌 人癌抗雌激素耐藥株,LCC9細胞 上皮細胞生長添加物MEpiCGSTBB(4,5,6,7-四溴-1H-苯并三唑)TBBT;NSC 231634質(zhì)量規(guī)格:>98%,蛋白激酶抑制劑
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MDA-MB-231(癌細胞)/氨芐(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Ampicillin Trihydrate
CL-0424RK1(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2阿替美唑鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRAtipamezole HCl
ICOSLG Others Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿替美唑鹽酸鹽(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品Atipamezole HCl
人內(nèi)根殼細胞RNAHHIRSC miRNA5 μg阿糖胞苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品Cytarabine
QBC939細胞,人膽管癌細胞 褐鼠胰島素瘤上皮細胞,RIN-m細胞 NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細胞培養(yǎng)Dacarbazine
雷丸探針法PCR鑒定試劑盒說明書人羊膜上皮細胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg雌激素酮硫酸鹽,去氫表雄酮硫酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%Dehydroepiandrosterone-3-sulfate
SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 纈鹽酸鹽 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USPValganciclovir
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1肌醇質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRIsitol
CL187/CCL187細胞,人大腸癌細胞 人色素
實驗流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。