更新時間:2024-01-17
MLE-12小鼠肺上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:Ovary細胞,人卵巢癌細胞 兔成骨C細胞,IF細胞 胎盤滋養(yǎng)層細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA 試劑盒 Rabbit Anti-dog IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗狗IgG 0.1mlGlyt1: 甘酸轉運蛋白1抗體 ICOSLG Others Hum
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
MLE-12小鼠肺上皮細胞 | 1×106 | P-X1082 |
1、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)
液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)棄上清,沉淀細胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸,然后按 1:2 比例進行分瓶傳代,最后放入 37℃,5%CO2細胞
培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
2、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時,棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用 PBS 清洗細胞一次;
2)添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終
止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉入液氮中進行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠胎兒表皮角質形成層細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 PAP(Mouse plasmin-antiplasmin complex) 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物 96T
nonstructural protein 1: A型流感病毒-NS1抗體 BRL 3A細胞,大鼠肝細胞 人轉移胰腺癌細胞,AsPc-1細胞 CM-R109大鼠腦成纖維細胞培養(yǎng)基100mL
C6 Others Human 人 C6 / compleme compone 6 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 試劑盒 SDF-1a/CXCL12 大鼠基質細胞衍生因子1a 96T
NET1: 去甲轉運蛋白/神經(jīng)遞質去甲轉運體抗體 人肺微血管內(nèi)皮細胞HPMEC
Hela-Luc (穩(wěn)定株)人細胞 Hela-Luc (stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+200ug/ml Zeocin 大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒 GMP-140 大鼠血漿α顆粒膜蛋白 96T
phospho-ITGB3(Tyr785): 0酸化整合素β3抗體 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
PA317細胞,逆轉錄病毒包裝的NIH3T3細胞 A10(大鼠主動脈血管平滑肌細胞) 小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14 人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 Connexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原) 0.5mg
phospho-IGF1R (Tyr980): 0酸化1受體抗體 CD48 Others Mouse 小鼠 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈平滑肌細胞總RNAHUASMC NA 人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 試劑盒 Anti-Collagen II II 型膠原(抗原) 0.5mg
phospho-IGF1R (Tyr1280): 0酸化1受體抗體 人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]
MLE-12小鼠肺上皮細胞SF9, 昆蟲卵巢細胞 大鼠白介素10受體β(IL10Rβ)ELISA試劑盒 NSE(Human Neuron-specific enolase) 人神經(jīng)特異性烯醇化酶 96T
RAGEF2: RAGEF2蛋白抗體 DNASE1 Others Human 人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
COS-1 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 大鼠白介素10受體α(IL10Rα)ELISA試劑盒 CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) 人肌酸激酶同工酶MB 96T
RAB23: G蛋白偶聯(lián)受體RAB23抗體 Mv1Lu細胞,貂肺上皮細胞 人紅白細胞白血病細胞,HEL細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS4
NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) 人前列腺酸性0酸酶 96T