更新時(shí)間:2023-11-08
普馬拉病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)公司相關(guān)產(chǎn)品肺成纖維細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)硫酸氫 II型含量97.0%-101.5%,II型Clopidogrel BisulfateCCRF-CEM細(xì)胞,急性細(xì)胞白血病T細(xì)胞 小鼠白血病細(xì)胞,C3細(xì)胞 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHHSEC cDNA/萘普酮>99%Nabumetone
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:普馬拉病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96482
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK硫代腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate salt美國(guó)進(jìn)口
Panc 10.05細(xì)胞,胰腺腺癌細(xì)胞 舌鱗癌細(xì)胞系,TSCCA細(xì)胞 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6腺嘌呤二核苷1酸鈉鹽Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate salt美國(guó)進(jìn)口
JeKo-1(套細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2腺嘌呤二核苷酸鈉鹽Nicotinic acid adenine dinucleotide salt美國(guó)進(jìn)口
Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝細(xì)胞維持培養(yǎng)液 500mlα-腺嘌呤二核苷酸α-Nicotinamide adenine dinucleotide美國(guó)進(jìn)口
胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]NAD+, 鋰鹽NAD+, Lithium Salt美國(guó)進(jìn)口
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苯甲酰基十字孢堿(PKC-412)≥96%,美國(guó)進(jìn)口Midostaurin
A431 表皮癌細(xì)胞無(wú)水鄰菲啰啉;1,10-菲羅啉AR,>99%1,10 –Phenanthroline anhydrous
PLC/PRF/5肝癌亞力山大細(xì)胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鄰菲啰啉一水;1,10-菲羅啉一水AR,>99%1,10-Phenanthroline hydrate
RSPO3 Protein Human 重組 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標(biāo)簽)鄰菲啰啉鹽酸鹽一水;1,10-菲羅啉鹽酸鹽AR,>99%1,10-Phenanthroline monohydrate
骨骼肌細(xì)胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse酮色林,凱他色林()HPLC>98%,Ketanserin
普馬拉病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞 STJ.EPI.H7細(xì)胞 COS-1(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)S-(+)-2-基-4-甲基-1-,英文名或英文縮寫:L-Leucinol,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT 116 [HCT116]3,5-二基異坐,97% 3,5-Dimqthylisoxczolq 300-87-8
REG1A Others Human REG1A / PSPS 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7.5PBS溶液超級(jí)透明無(wú)混濁液體RTsigma
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA脲酶,英文名或英文縮寫:Urease(jack bean),級(jí)別:BR,RZ~3,≥250u/mg,規(guī)格:25克
KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) -基本酚2-Aminopxenol