更新時間:2023-10-28
Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品胚肺二倍體細胞;HEL-2萊苞迪甙C()Rebaudioside CHPLC≥98%,大鼠骨髓瘤細胞;IR983F 結(jié)腸腺癌細胞,Caco-2細胞 WEHI 164細胞,鼠纖維肉瘤細胞系D-(-)-扁桃酸;R-扁桃酸(R)-(?)-Mandelic acid>99%,BRGBC-SD, 膽囊癌細胞 Human1-氨基海因鹽酸鹽;AHD,1-氨基
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T 0.2PCR管
編號:BH-P97048
分類:PCR-熒光探針法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
CNE-1 高分化鼻咽癌細胞參皂苷Rb1()Ginsenoside Rb1HPLC≥98%,
P9-EGFP-puro小鼠骨髓基質(zhì)細胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S參皂苷Rb2()Ginsenoside Rb2HPLC≥98%,
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)參皂苷Rb3()Ginsenoside Rb3HPLC≥98%,
心肌細胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 Mouse參皂苷Rc()Ginsenoside RcHPLC≥98%,
小鼠T細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)參皂苷Rd()Ginsenoside RdHPLC≥98%,
TNFRSF21 Others Mouse 小鼠 DR6 / TNFRSF21 細胞裂解液 (陽性對照) 毒死蜱()分析,99%Chlorpyrifos
CM-H093顱蓋造骨細胞*培養(yǎng)基100mL滅蠅胺標準溶液(10μg/ml,u=2%)10μg/ml,u=2%Cyromazin solution
LILRB1 Others Human LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 細胞裂解液 (陽性對照) 多菌靈(分析,99%)分析,99%Carbendazim
直腸平滑肌細胞HRSMC(分析,98%)分析,98%Carbaryl
Ca Ski細胞,小腸頸部表皮樣癌細胞 癌細胞,ZR75-1細胞 狗間充質(zhì)干細胞-脂肪DMSC-ad鹽酸水蘇堿()分析Stachydrine
Cry1A(b/c)基因核酸檢測試劑盒山羊腎上皮樣細胞;DG-K1N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀-d5美國進口N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5
CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀美國進口N,N-Didesmethyl Trimebutine
腮腺細胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)N-去甲基鹽酸曲美布汀美國進口N-Demethyl Trimebutine
高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd 正常皮膚細胞,TE 353.Sk細胞 HO-8910(卵巢癌細胞)柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸美國進口Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide
神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251N-甲酰伐倫克林美國進口N-Formyl Varenicline