更新時(shí)間:2023-10-30
豬勞森氏胞內(nèi)菌(LI)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品97H-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)肝癌細(xì)胞 97H-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,溶劑:水)
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:豬勞森氏胞內(nèi)菌(LI)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96767
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
PC-12細(xì)胞,大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞) 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B洛匹那韋()LopinavirHPLC>98%,
CXCL12 Protein Human 重組 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)Loratadine>99%
SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ()Loratadine>99%,
心肌細(xì)胞HCM褪素,果體素Melatonine>99%,BR
A2M Others Human A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 褪素,果體素()MelatonineHPLC>98%,
hPC-PL-c 類胎盤周細(xì)胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細(xì)胞MMa度> 98.5%,BR,二水合物Balofloxacin Dihydrate
CL-0454TE-11(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸苯達(dá)莫司汀度> 98%Bendamustine HCl
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸苯達(dá)莫司?。ǎ?/span>HPLC>98%,Bendamustine HCl
膀胱平滑肌細(xì)胞RNAHBdSMC miRNA5 μg澳洲茄邊堿()HPLC≥95%,Solamargine
兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF 肝癌細(xì)胞,Hep 3B2.1-7細(xì)胞 IR983F細(xì)胞,大鼠骨髓瘤細(xì)胞澳洲茄堿()HPLC≥94.50%,Solasonine
豬勞森氏胞內(nèi)菌(LI)核酸檢測試劑盒永生化表皮細(xì)胞;HaCaT1-氨基-2-萘酚-4-磺酸AR1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利卡西平;10,11-二氫-10-羥基>98%,美國進(jìn)口原裝10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B三七皂苷R2(S型)()HPLC≥90%,S-Notoginsenoside R2
LS174T細(xì)胞,結(jié)腸癌細(xì)胞 色素瘤細(xì)胞,SK37細(xì)胞 成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2無水醋酸鋅ARZinc acetate
HCT 116(結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25-氟吲哚-2-羧酸>98%,*5-Fluoroindole-2-carboxylic acid
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。