更新時(shí)間:2023-10-30
豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品marc-145-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)猴胚胎腎上皮細(xì)胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin1,4,5,8-萘四甲
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96763
分類(lèi):熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
PG-LH7細(xì)胞,肺巨細(xì)胞癌(PG)的低轉(zhuǎn)移亞系 小鼠胚成纖維包裝細(xì)胞,ψ2細(xì)胞 CL-0026ARPE-19(視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2四溴雙酚A雙(2-)(>93.0%(GC))Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether>93.0%(GC)
ST(豬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24,4'-(六氟異亞丙基)二酞1(>98.0%(GC)(T))4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride>98.0%(GC)(T)
HDMEC-c pre-screened 微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)預(yù)選型 500,000cells 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells(1ml)3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride>96.0%(T)
胃粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells(1ml)三環(huán)[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride>98.0%(GC)
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ε-己內(nèi)酯(>99.0%(GC))ε-Caprolactone>99.0%(GC)
SK-MEL-1(皮膚色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 V79(中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)L-天鉀>99%,BRL-Aspartate Potassium
CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2輔酶Q10,泛醌>98%,BRCoenzyme Q10,Ubiquinone
DCBLD1 Others Human Discoidin / DCBLD1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 輔酶Q10()HPLC≥98%,Coenzyme Q10
多聚賴(lài)氨酸 1 mg/mlPLL維生素A醋酸酯()HPLC≥99%,vitamin A acetate
Ovary細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞 兔成骨C細(xì)胞,IF細(xì)胞 胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)依澤替米貝β-D-葡萄糖苷酸美國(guó)進(jìn)口Ezetimibe β-D-Glucuronide
豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)核酸檢測(cè)試劑盒臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNAHUASMC NA低碳硫鐵助溶劑shēng huà shì jì容量:RT,避光5克
MFAP5 Others Human MFAP5 / MAGP2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2,2,4-三基務(wù)烷;異忻烷 2,2,4-TriMqthylpqntcnq 240-84-1
腹膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLshēng huà shì jì容量:RT25克
PA317細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞 A10(大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞) 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14苞肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100毫升
CSF2 Protein Human 重組 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)1041-01-63,5-二-L-甲腺酸(-20°C)3,5-Diiodo-L-thyronine