更新時(shí)間:2023-11-09
Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)儲存:長期保存制品于-20℃,保存 2 年。
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
商品屬性
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
P-PR1245 | Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混) | 100Tx20μl |
該制品為單一組分的 MasterMix(2 倍濃度),包含了反應(yīng)緩沖液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時(shí)只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫?cái)U(kuò)增。Bst4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無論DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行高效的恒溫?cái)U(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及 RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的試劑。優(yōu)化的反應(yīng)體系,確??焖俚耐瓿蓹z測試劑的反應(yīng)體系建立。該系列產(chǎn)品不包含任何其它輔助染料,在 LAMP 的擴(kuò)增搭配 OG 橙綠變色管進(jìn)行可視化變色反應(yīng)。除此外,該制品還可以用于其它恒溫?cái)U(kuò)增實(shí)驗(yàn),包括 CPA、SMAP 等。
儲存:長期保存制品于-20℃,保存 2 年。
使用實(shí)例(以 LAMP OG 橙綠變色為例)橙綠變色染料(OG Dye)以凍干的形式預(yù)加在 8 聯(lián)管蓋上。在 LAMP 反應(yīng)完畢后(在反應(yīng)完畢前,務(wù)
必不能將管蓋上染料混入反應(yīng)液中),將 0.2ml EP 管顛倒溶解 OG 染料后。LAMP 的反應(yīng)產(chǎn)物將與 OG 染料形成強(qiáng)烈的綠色肉眼可見變色反應(yīng)(陽性),而未發(fā)生擴(kuò)增的 EP管為深橙色(陰性)。
(1)配制反應(yīng)體系
在 0.2ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑
2xBst 4.0 Basic Mix 10 μl
*10xLAMP Primer Mix 2 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 20 μl
*10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4 μM、F3/B3 分別為 2 μM全部試劑加入完畢后,輕彈 EP 管底部后,再蓋上 OG 橙綠變色管(蓋上管蓋后務(wù)必不能再劇烈混合與倒置,以防止將管蓋上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入反應(yīng)液中將會終止 LAMP 反應(yīng))。
實(shí)驗(yàn) LAMP Primer Mix 分別采用 1、1.5、2 μl,以陰性不變色,陽性樣品正常變色為標(biāo)準(zhǔn),作為后續(xù)測試用量。
(2)反應(yīng)體系配好后,置于 60~68°C(實(shí)驗(yàn)采用65°C)進(jìn)行反應(yīng) 20~45min。(擴(kuò)增良好的引物組合,通常 25min 即可變色,一般不超過 45min,實(shí)驗(yàn)設(shè)置20、25、30、45min)。
(3)觀察結(jié)果:觀察結(jié)果時(shí),盡可能不要與配制反應(yīng)空間共用,以防止污染操作臺。將反應(yīng) EP 管倒置,并手腕輕甩,反應(yīng)液浸泡 EP 管蓋上的 OG 染料,靜置 30s。再將 EP 反應(yīng)管正置,并輕甩反應(yīng)液到 EP 管底部,此時(shí)擴(kuò)增樣品將變?yōu)轷r艷肉眼可見綠色,而陰性未發(fā)生擴(kuò)增的管將為深橙色。
注意事項(xiàng)
1. 在用于其它恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)時(shí)(如 CPA、SMAP 等),可參考如上策略進(jìn)行使用,反應(yīng)時(shí)間可能會需要調(diào)整。
2. 關(guān)于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應(yīng)體系后,可加入一滴礦物油覆蓋于反應(yīng)液上部,以減少氣溶膠的污染。
3. 鑒于特殊的生產(chǎn)工藝, 全系恒溫?cái)U(kuò)增 Mix 系
列均不能進(jìn)行濁度分析。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Collagenase ELISA Kit | 豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲型經(jīng)典株RT-PCR試劑盒 |
βGD ELISA Kit | 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit |
α-enolase ELISA Kit | Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 16(ZFYVE16)ELISA Kit |
3',5'-Bisphosphate Nucleotidase 1(BPNT1)ELISA Kit | Orf1ab-N片段RT-PCR試劑盒 |
HBcAb ELISA Kit | 白樂杰馬杜拉放線菌PCR試劑盒 |
26S proteasome,26S PSM ELISA Kit | 布氏旋毛蟲PCR試劑盒 |
αNAG ELISA Kit | 禽腎炎病毒型PCR檢測試劑盒 |
5-LO/LOX ELISA Kit | 禽戊型肝炎病毒PCR檢測試劑盒 |
CG ELISA Kit | 豬瘟病毒野生株PCR檢測試劑盒科研用 |
α-Fodrin ELISA Kit | 巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒 |
LAT ELISA Kit | 巴貝斯屬蟲通用PCR檢測試劑盒直銷 |
α2 macroglobulin,α2 MG ELISA Kit | 豬瘟病毒野毒株(CSFV-W)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
5-NT ELISA Kit | Bst 4.0 Basic Mix (液體預(yù)混)Collagenase II 小鼠膠原IIELISA檢測試劑盒 |
CG ELISA Kit | 17酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 |
足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 | 2,3-二磷suan甘油suan(2,3-DPG)ELISA試劑盒 |