公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠雄(ASD)ELISA試劑盒 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE  小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 96T

BA46： 上皮細(xì)胞抗原BA46抗體 SK-N-MC細(xì)胞，神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]

CD38 Others Human 人 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠雄(ASD)ELISA 試劑盒 Plant Vitamin A,VA  植物96T

Metal ion transporter： 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 人毛細(xì)胞RNAHHDPC miRNA5 μg

SNU-739人肝癌細(xì)胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS 大鼠β-4(TMSB4X)ELISA試劑盒 Plant Vitamin E,VE E 植物 96T

CXCL3 Protein Human 重組人 CXCL3 / GRO gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)ELISA 試劑盒 ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗原 0.5mg

HEV Capsid protein： 戊型肝炎病毒抗體 FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人鈣網(wǎng)蛋白(C)ELISA 試劑盒 ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗原 0.5mg

HBP1： HMG盒區(qū)內(nèi)含蛋白1抗體 牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株，ECV304細(xì)胞 TC-1細(xì)胞，HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人鈣調(diào)素(CAM)ELISA 試劑盒 ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原 0.5mg

HEPG2人肝癌細(xì)胞SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17 人呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒 TTV(Human transfusion transmitted virus)  人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒 96T

PSMD8： 蛋白酶調(diào)解因子8抗體 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素HEM-d

FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA 試劑盒 17-OHP  大鼠17羥孕酮 96T

Protein C inhibitor： 蛋白C抑制因子抗體 CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MGC-803 人胃癌細(xì)胞 大鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA 試劑盒 HEV-IgM(Human Hepatitis D virus IgM)  人戊型肝炎病毒IgM 96T