更新時間:2023-10-26
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100菌株一種常用于質(zhì)??寺〉木?。其φ80lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*1003. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項
1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*1002. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
Kim-1 大鼠腎損傷分子1 規(guī)格: 48T/96T
Renin 大鼠腎素 規(guī)格: 48T/96T
ADM 大鼠腎上腺髓質(zhì)素 規(guī)格: 48T/96T
ADRA1A 大鼠腎上腺素能a1A受體 規(guī)格: 48T/96T
ADRA1A 大鼠腎上腺素能a1A受體 規(guī)格: 48T/96T
EPI 大鼠腎上腺素 規(guī)格: 48T/96T
NT-4 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4 規(guī)格: 48T/96T
NT-3 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3 規(guī)格: 48T/96T
NSE 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶 規(guī)格: 48T/96T
NP-Y 大鼠神經(jīng)肽Y 規(guī)格: 48T/96T
NGF 大鼠神經(jīng)生長因子 規(guī)格: 48T/96T
GFAP 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ENA-78/CXCL5 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78 規(guī)格: 48T/96T
PEDF 大鼠色素上皮衍生因子 規(guī)格: 48T/96T
T3 大鼠*狀腺原氨酸 規(guī)格: 48T/96T
大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA Kit,48T/96T 大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
LF/LTF 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
LDH 大鼠乳酸脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
CACT 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T
β-CG 大鼠絨毛膜β 規(guī)格: 48T/96T
CG 大鼠絨毛膜 規(guī)格: 48T/96T
PAPP-A 大鼠相關(guān)血漿蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
HSF1 大鼠熱休克因子1 規(guī)格: 48T/96T
HSP gp96 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96 規(guī)格: 48T/96T
HSP-90 大鼠熱休克蛋白90 規(guī)格: 48T/96T
HSP-70 大鼠熱休克蛋白70 規(guī)格: 48T/96T
Hsp-60 大鼠熱休克蛋白60 規(guī)格: 48T/96T
HSP47 大鼠熱休克蛋白47 規(guī)格: 48T/96T
HSP-40 大鼠熱休克蛋白40 規(guī)格: 48T/96T
HSP-27 大鼠熱休克蛋白27 規(guī)格: 48T/96T
HSP-20 大鼠熱休克蛋白20 規(guī)格: 48T/96T
ALD 大鼠醛固酮 規(guī)格: 48T/96T
i-PTH 大鼠全段甲狀旁腺素 規(guī)格: 48T/96T
NA 大鼠 規(guī)格: 48T/96T
FK 大鼠趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
Hyp 大鼠羥 規(guī)格: 48T/96T
Pro-ANP 大鼠前心鈉肽 規(guī)格: 48T/96T
Pro-ANP 大鼠前心鈉肽 規(guī)格: 48T/96T
MSU440 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100 PSA 大鼠前列腺特異性抗原 規(guī)格: 48T/96T
PAP 大鼠前列腺酸性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
PGF 大鼠前列腺素F 規(guī)格: 48T/96T